中山大学孙逸仙纪念医院龚畅教授和李隽教授发表研究，研究者从曲妥珠单抗耐药的HER2阳性乳腺癌患者样本中，筛选出关键的环状RNA CDYL2(cirCDYL2)，揭示了cirCDYL2-GRB7-FAK通路促进曲妥珠单抗耐药的原理。该研究弥补了临床预测曲妥珠单抗疗效和耐药的生物学指标空白，并为逆转曲妥珠单抗耐药提供了参考。(Mol Cancer. 2022年1月3日在线版 doi: 10.1186/s12943-021-01476-7)

研究者采用高通量测序技术，从对曲妥珠单抗耐药的HER2阳性乳腺癌患者的肿瘤样本中，筛选出特异性高表达的环状RNA分子cirCDYL2。通过分析127个接受过曲妥珠单抗治疗的HER2阳性早期乳腺癌患者的数据发现，高表达cirCDYL2的乳腺癌肿瘤，肿瘤的尺寸更大，淋巴转移能力和增值能力更强，复发率更高，患者的无病生存期及总生存期更短暂。同时，cirCDYL2高表达的肿瘤中，Ki67(肿瘤增殖相关蛋白)表达，磷酸化AKT(P-AKT)和磷酸化ERK(P-ERK)的量更高。研究者推测cirCDYL2与HER2阳性乳腺癌患者对曲妥珠单抗耐药有关。

研究者用HER2阳性乳腺癌患者的癌细胞构建了人源肿瘤异种移植模型(PDX)，通过连续4周瘤内注射小干扰RNA阻止cirCDYL2发挥作用(沉默)，发现cirCDYL2被沉默的实验组对曲妥珠单抗更敏感，肿瘤中的Ki67、P-AKT和P-ERK表达量都显著下降。

研究者构建了两个曲妥珠单抗耐药的HER2阳性乳腺癌细胞系SK-BR-3和BT474，从细胞层面研究cirCDYL2分子带来的变化。研究发现，cirCDYL2与HER2阳性乳腺癌细胞的曲妥珠单抗耐药有关。

研究者发现HER2与cirCDYL2之间没有直接的调控关系，其中一个分子的表达量变化，不会直接影响另一个分子。cirCDYL2是通过GRB7蛋白去促进HER2+乳腺癌细胞的曲妥珠单抗耐药。cirCDYL2通过FAK来促进HER2阳性乳腺癌细胞曲妥珠单抗耐药。

仅敲除cirCDYL2或者注射曲妥珠单抗这两种手段对已经耐药的肿瘤生长无明显影响，但在敲除cirCDYL2且注射曲妥珠单抗的实验组，肿瘤生长被显著抑制。说明敲除cirCDYL2可以逆转肿瘤对曲妥珠单抗的耐药。

使用FAK或者GRB7蛋白抑制剂干预，也可以达到敲除cirCDYL2类似的效果。即使是过表达cirCDYL2的肿瘤，使用FAK或者GRB7蛋白抑制剂也可以缓解曲妥珠单抗耐药。cirCDYL2确实促进了曲妥珠单抗耐药，FAK及GRB7蛋白抑制剂可缓解曲妥珠单抗耐药。

该研究揭示了cirCDYL2-GRB7-FAK通路在维持HER2表达中的关键作用，及其参与曲妥珠单抗耐药的机理。同时证明cirCDYL2可以作为曲妥珠单抗耐药、HER2阳性乳腺癌患者的潜在的标志物，弥补临床预测曲妥珠单抗疗效和耐药的生物学指标空白，进而优化患者临床治疗方案。FAK或GRB7抑制剂、cirCDYL2沉默或可成为逆转曲妥珠单抗耐药的治疗思路。

(编译 韩静)